碱提法:与酸提类似,有些多糖在碱液中有更高的提取率,尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。将干燥的绿藻粉末制成浮液,热水浸泡提取或将含水绿藻直接用热水提取后离心分离,取黏稠的固状物,加入碱水,在pH3.0的条件下再行搅拌提取,碱水提取液在搅拌的同时加入酸水调节pH值至3~4,静置沉降后离心得酸性多糖。另外,稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析,浓缩与醇析而获得多糖沉淀。分别称取4种动物材料3份,每份50g,做平行实验:加100mL0.1mol/LNaOH溶液,在60℃水浴中保温24h,冷却后,用三氯乙酸调pH至4左右,6000r/min离心l5min,取上清液加2倍体积乙醇摇匀,出现絮状沉淀后静置,取沉淀加适量90%乙醇振荡,静置,倒出上清液。用无水乙醇处理2次,过滤,沉淀再用无水乙醇洗2次,将沉淀摊于平皿上50℃烘干,得粗品。粗品经糖含量、蛋白含量测定后,加入适量水重新溶解,加0.5倍体积酒精摇匀,静置片刻后,6000r/min离心15min,除去蛋白杂质。上清液中再加入酒精,至乙醇体积分数约60%,摇匀后静置,待沉淀后,小心将上清液倒出,沉淀中加入适量90%酒精和无水乙醇2次脱水,过滤后沉淀再用无水乙醇洗2次,摊于平皿上,50℃烘干,得到多糖精品。
离子交换树脂提取生物碱优点一,操作简便,一般只要用酸水提取,离子交换,氨水洗脱三步就可以得到总生物碱,对油脂含量比较高的植物样品可以不必脱脂,就直接能用酸水提取,在整个操作过程中也不会产生乳化。二,有机溶剂用量很小,主要溶剂是蒸馏水,离子交换,树脂再生处理后可以反复利用。三,得到的总生物碱纯度很高,尤其是yi醚洗脱的部分,这样有利于总检中各种生物碱的进一步分离。四,设备简单大的设备,主要是植物原料的粉碎和酸水提取,而当酸水通过树脂柱以后,由于生物碱几十倍几百倍的浓缩,所以其他设备的容积就更大缩小,因此树脂法不只适用于实验中的生物碱分离提取还是用于工业生产。虽然用离子交换树脂法,从植物中提取分离生物碱,有很多优点,但是是否适用于所有类型的生物碱提取,还有待今后实验中验证,另外植物原料中无机盐或粘液质含量较高时,也常常会干扰生物捡栗子的提取,有些容易被酸碱分解的生物碱,在操作过程中可能被破坏,因此在使用离子交换法进行生物简答题取之前极好先做小试验,并与现有的方法比较,再做选择。
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